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植物查爾酮合成酶(chalcone synthase)活性比色法
時間:2021/3/10 點擊次數:1054
植物查爾酮合成酶(chalcone synthase)活性比色法定量檢測試劑盒產品說明書(中文版)
主要用途
植物查爾酮合成酶(chalcone synthase)活性比色法定量檢測試劑是一種旨在通過香豆酰輔酶 A 和丙二酰
輔酶 A 縮合反應系統中釋放出巰基輔酶 A,使用 Ellman 試劑后,產生黃色 5-巰基-2-硝基苯甲酸產物吸光
峰值的變化,即采用比色法來測定植物裂解樣品中酶活性的*而經典的技術方法。該技術經過精心研制、
成功實驗證明的。其適合于各種植物組織,包括種子(seed)、葉片(leaf)、根(root)、胚胎葉(cotyledon)、
上胚軸(epicotyl)等查爾酮合成酶的活性檢測。產品嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩定。
技術背景
查爾酮合成酶(chalcone synthase;CHS;EC2.3.1.74)是聚酮體合成酶(polyketide synthase;PKS)大家屬
中的一員,是啟動類黃酮(flavonoid)化合物合成通路中*步關鍵酶,形成植物系統性獲得性抗性
systematic acquired resistance;SAR)的基礎。查爾酮合成酶存在于細菌、植物和真菌中。在所有裸子植
物(gymnosperm)和被子植物(angiosperm)的各種不同發育階段中的不同組織中表達。查爾酮合成酶為
同源二聚體,分子量為404000Kd,由環境壓力,包括UV照射、傷口、病原菌襲擊等誘導,通過丙二酰
輔酶A脫羧基反應(decarboxylation)、與香豆酰輔酶縮合、聚酮體鏈延展(chain elongation)、中間產物環
狀化(cyclization)和芳構化(aromatization)產生查爾酮,一種類黃酮化合物前體,作為化學信使,由此
生成各種后續繼發性代謝化合物,參與抗病原微生物例如異黃酮植物保護素(isoflavonoid phytoalexin)、花
青素花色素化、抵御環境壓力(UV光保護)、花粉育性(pollen fertility)、抗氧化、共生根系結瘤(symbiotic
root nodulation),以及作為抗生素、免疫抑制劑、抗腫瘤和抗真菌的藥物作用。還在細菌的囊腫形成和阿米
巴細胞分化中產生作用?;谙愣辊]o酶A和丙二酰輔酶A,在敏感性抑制劑木犀草素(Luteolin)存在與
否的情況下,受到查爾酮合成酶的作用,縮合產生查爾酮,并釋放出巰基輔酶ACoA-SH),進而與Ellman
試劑5,5-二硫基-雙(2-硝基苯甲酸)[5,5,-dithiobis-2-nitrobenzoic acid);DTNB]反應后,產生黃色的5-
-2-硝基苯甲酸(5-thio-2-nitrobenzoic acid;TNB),通過其吸收峰值的變化(412nm波長),來定量分析
查爾酮合成酶的活性。查爾酮合成酶反應系統為:
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