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MB脂肪酸β氧化速率比色法檢測試劑盒產品說明書(中文版)
時間:2021/3/10 點擊次數:888

MB50679 v.A

 

  脂肪酸β氧化速率比色法檢測試劑盒產品說明書(中文版)

 

主要用途

 

  脂肪酸β氧化速率(β oxidation rate)比色法檢測試劑是一種旨在通過棕櫚酰肉堿氧化依賴性鐵*還原,即單位時間還原產物峰值降低,即采用比色法來測定線粒體裂解樣品中脂肪酸β氧化速率*而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種細胞、組織中線粒體裂解懸液樣品(動物、人體等)脂肪酸β氧化速率的檢測。產品嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩定。

 

技術背景

 

脂肪酸β氧化過程(β-oxidation)在動物組織的線粒體發生的脂肪酸代謝通路,可概括為活化、轉移、β氧化及后經三羧酸循環被徹底氧化生成CO2H2O,并釋放能量等四個階段,是體內,尤其是組織器官,例如肝臟、心臟和骨骼肌等能量內平衡的關鍵代謝通路。食物中甘油三酯提供體內三分之一的能量供給,骨骼肌和心臟消耗80%的總能量。脂肪酸代謝異常,將導致脂質聚集在非脂肪組織內,產生慢性病的病理基礎,例如糖尿病、心衰、肥胖癥等。其中β氧化,包括脫氫、水合、二次脫氫和硫解,是將活化的各種長度脂酰輔酶酯(acyl CoA esters)不斷縮短為乙酰輔酶Aacetyl CoA)單位,后經過三羧酸循環和呼吸鏈氧化成CO2和水。脂?;o酶A脫氫酶(acyl CoA dehydrogenase;AD;EC.1.3.99.3)是脂肪酸代謝進入β-氧化后工作的重要酶之一。通過底物棕櫚酰肉堿(palmitoyl carnitine)的氧化產生的電子,由鐵*(ferricyanide)捕獲而還原,其還原速率的檢測,來評價β氧化的速率,即吸光值(420nm波長)的下降與時間的對應關系。

                              

產品內容

 

  緩沖液(Reagent A  20毫升

  反應液(Reagent B   2毫升

  底物液AReagent C   1毫升

  底物液BReagent D   1毫升

  陰性液(Reagent E     1毫升

產品說明書      1

 

保存方式

 

保存  反應液(Reagent B)、  底物液AReagent C)和  底物液BReagent D在-20冰箱里;其余的保存在4冰箱里;  底物液AReagent C)和  底物液BReagent D避免光照;有效保證6

 

用戶自備

 

1.5毫升離心管:用于反應操作的容器

比色皿:用于比色的容器

分光光度儀:用于比色分析

 

實驗步驟

 

  • 測定準備

 

  • 準備好待測樣品(例如純化線粒體),至于冰槽里備用
  • 開啟并設定好分光光度儀(溫度為25℃):波長420nm470nm,間隔1分鐘,讀數6次(共5分鐘),并置零 
  • 從-20℃冰箱里取出試劑,置于冰槽里融化;  底物液AReagent C  底物液BReagent D避免光照
  •   緩沖液(Reagent A室溫下均衡溫度
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