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SK-NEP-1 人腎母細胞瘤細胞中文版說明書
時間:2021/10/20 點擊次數:456

細胞名稱:

SK-NEP-1 人腎母細胞瘤細胞

半貼壁,不規則型細胞 

編號:

352207 產品形式:

2mL 凍存管 × 2 支、或 T25 × 1 瓶 ;

安全等級:

一級,安全柜或超凈臺操作

收貨須知:收貨當天發現異常,請在 24 小時內及時聯系客服,逾期視為收貨良好;凍存管形式,收貨后及時置于-80℃冰箱保存,若 長時間不使用,應過夜轉移至液氮保藏;T25 形式,收貨后先培養瓶原裝置于培養箱靜養 4h,然后再對細胞進行常規操作。復蘇時每 管一次用完不得留存,復蘇后傳一代,即可正常使用。請嚴格按照本說明操作,否則造成細胞失活等情形,不予提供補發服務。

培養條件:

37℃,5%CO2,CM24-1 培養液。CM5-1 培養液:85%McCoy’s 5a+15%FBS。McCoy’s 5a:MC’5A 培養基,含谷氨酰胺。

復蘇步驟:

①新制 100mm 平皿 1 個,含 12mL 上述培養液;②凍存管從液氮或-80℃中取出,37℃水浴 1~2min,待完全溶解后盡快移入 安全柜復蘇;③用無菌吸管吸取溶解液打入新制平皿中,順時針搖勻;④放入(37℃,5%CO2)培養箱中,過夜換液,3-5 天長滿。

傳代/凍存:

將舊培養液吸除,PBS 清洗兩遍后,無需使用胰酶消化,直接加入 12mL(/100mm 皿)培養液,用吸管吹打細胞至完全脫 落,輕輕吹打均勻,可分 3~6 皿培養;凍存則將細胞轉移至離心管中,(110g,3min)離心,離心完成后用 6mL 凍存液(90%FBS+10%DMSO) 重懸細胞,吹打均勻,分為 6 支凍存管,用程序降溫盒于-80℃凍存。 

復蘇質量記錄:

根據復蘇要求,對以上細胞株進行復蘇,記錄結果如下: 

項目 質量標準 復蘇記錄

復活性: 12h 貼壁,86h 長滿 80% 過夜 18h 后觀察貼壁,96h 密度達 80% 細胞形態: 半貼壁,不規則型細胞 CM24-1 培養液中,半貼壁,不規則型,有圓形、短梭性 附圖: 結論: 復活性好,且細胞形態無異常,合格

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