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如何避免elisa試劑盒實驗的誤差概率?

時間:2022-01-18 點擊次數:341
  做實驗出現誤差在所難免,不過我們做好了相關事項的話還是可以降低這種概率的。那如何降低elisa試劑盒實驗的誤差概率呢?
  一、檢驗技師。應具備從事實驗室操作的基本素質和實踐經驗。能熟練操作實驗儀器、器械,具有一定總結和分析問題的能力,對實驗中出現的意外情況能及時妥善解決。
  二、使用校對過的微量移液器,排除自然誤差。移液器準確與否對定量檢測尤為重要。
  三、仔細閱讀說明書。嚴格按照說明書要求進行規范化操作。ELISA試劑盒不同批號的試劑不可混用。值得改進的地方,反復試驗確定成立后才能改進。
  四、洗滌干凈。洗板不干凈,酶結合物本底顯色會呈現假陽性。洗滌液要新鮮,現用現配,陳舊的洗滌液會出現本底增高現象,也可能出現假陽性。
  五、嚴控反應時間。elisa試劑盒反應時間過長,酶失活;反應時間過短,酶結合物不能與血清中的微生物抗原抗體充分結合,生成物結構松散不牢固,容易洗掉,都可能造成假陰性。
  六、注意ELISA試劑盒保存期,過保存期的試劑不能使用。
  七、評估試劑的實用性。試劑的穩定與否,對準確率的高低到頭重要。在試劑啟用前,應進行陰、陽對照及樣品反復比照試驗,判定試劑符合要求后方可使用。
  八、嚴格掌握顯色時間。顯色時間過短,加入終止液反應終止后,底物結合物的量過少,易出現假陰性。超過顯色要求時間后顯色,應判為假陽性,這可能與試劑本身有關。加顯色劑后立即顯色,不可報陽性,這可能是本底顯色的結果。
  九、加樣要準確、快速。如果加樣不準確,酶生成物的量不能確定,elisa試劑盒直接影響顯色結果。顯色的深淺及A值的測定與加入顯色劑和終止液的量有關,所以加樣應慎重。

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